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SYBR 14绿色荧光核酸染料通常用来检测精子活力，通过联合SYBR 14和碘化丙啶（PI）的双染方式能评估精液中的活精子占比。SYBR 14是一种核酸染料，与DNA结合后的最大吸收波长是488nm，发射波长是518nm。SYBR 14将活精子的核染成明亮绿色，反之，PI仅将丧失膜完整性的无运动精子染成红色。活/死精子的占比通过先用SYBR/PI染色，之后再用流式分析染料摄取的方法进行判断。

本制品以DMSO储存液形式提供，浓度为5mM。只需用合适的生理缓冲液稀释到工作浓度进行简单孵育即可，适用于哺乳动物精液样本。

• 再次冻存本品前务必拧紧盖子，管子建议直立保存。
  
• 目前没数据表明该探针具致畸性或毒性。由于该探针与核酸结合，可能被当作一种潜在的突变剂，需做适当的防护措施。由于DMSO能促进有机分子进入组织，此储存液在使用的过程中务必妥善操作。根据当地的政策来处理使用本品后的废液。
  
• 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• 工作液的准备：
  
  • 初次使用，将低温保存的SYBR 14（5mM）从冰箱取出，置于室温或25℃温育至少30min，使其充分融化。按照单次用量分装后，置于≤-20℃避光干燥保存。
    
  • 于正式使用前，用合适的生理缓冲液稀释SYBR 14（5mM）到10～20μM的工作液。
• 染色流程：
  以下染色流程仅用作基本参考。试剂浓度必须根据精液来源、精子密度以及样本内的其他材料来进行优化调整。
  
  • 用含10% BSA的HEPES缓冲盐溶液（10mM HEPES,150mM NaCl，10% BSA，pH7.4）稀释样本（比如：精液样本）
    
  • 取5μL步骤1b新鲜制备的SYBR 14工作液，加入1mL稀释样本中。
    
  • 37℃孵育5～10min。
    
  • 用荧光显微镜（FITC滤片）或流式细胞仪（488nm激发器，530/30nm滤片）进行样本分析。